رنگ آمیزی سلول های گیاهی و جانوری

منوی اصلی

آمار سایت

اعضا : 28
محتوا : 1417
بازدیدکنندگان : 42662

جست و جو در ایران گفتمان

مسیر سایت

مقالات و خبر علمی

زیست شناسی

رنگ آمیزی سلول های گیاهی و جانوری

ورود به سایت

رنگ آمیزی سلول های گیاهی و جانوری

نوشته شده توسط پونه مومن زاده

پنجشنبه, 06 اسفند 1388 ساعت 13:29

یکی از اصول و روش های مطالعه سلول های گیاهی و جانوری استفاده از متد رنگ آمیزی است.بااستفاده از رنگ های مختلف زیستی می توانیم اجزا و ارگانرهای مختلف سلول را رنگ آمیزی کنیم.

اساس و پایه رنگ آمیزی ترکیب مولکول های ماده رنگی مورد نظر با مولکول های اندام یا اجزای هدف می باشد.تعدادی از مواد رنگی به صورت رنگ عمومی کاربرد دارد و برخی از رنگ ها مثل سبز ژانوس رنگ اختصاصی میتوکندری و یا قرمز خنثی برای رنگ آمیزی واکوئل است.رنگ های زیستی به رنگ هایی اطلاق می شود که هیچ گونه اثر سوئی در سلول های زنده نداشته باشد.

یک تعداد از رنگ های مورد استفاده رنگ های اسیدی و یک عده دیگر جز رنگ های بازی است که این مواد هم با قسمت های آنیونی و کاتیونی غشای اندامک ها ترکیب می شوند و موجب رنگی شدن آن دیواره ها می شوند.

۱.رنگ آمیزی سلول های اپیتلیال دهانی

از قسمت درونی دهان(گونه)به وسیله قاشقی سلول های شاخی نشده سست می کنیم و روی لام می کشیم.با حرارت آن را فیکس می کنیم.مقداری الکل رو آن ریخته و زمان می دهیم تا الکل بپرد.سپس با یکی از مواد رنگی آن را رنگ می کنیم.بعد از ۴ دقیقه عمل شست و شو را انجام می دهیم.و آن را با میکروسکوپ مشاهده می کنیم.

شکل زیر سلول های اپیتلیال دهانی را نشان می دهد:

مشاهدات:

سلول ها با فاصله از هم قرار گرفته اند.این فاصله را مایع بین سلولی پر کرده سلولها به طور نامنظم پراکنده اند و شکل خاصی ندارند(به دلیل عدم وجود دیواره سلولی)هسته و اندامک ها به صورت نقاطپررنگ(به دلیل وزن بیشتر)در داخل سلول قابل مشاهده اند.

۲.رنگ آمیزی بشره پیاز

یک قطره آب روی لام قرار می دهیم و برشی از بشره(اپیدرم)پیاز را روی آن قرار می دهیم از ماده رنگی روی آن می ریزیم.روی آن لامل می گذاریم و با میکروسکوپ مشاهده می کنیم.

شکل زیر سلول های بشره پیاز را نشان می دهد:

مشاهدات:

سلول های گیاهی به صورت فشرده در کنار هم قرار دارند.سلول های گیاهی به دلیل وجود دیواره دارای ابعاد هستند.فضای بین سلولی در بین آنها وجود ندارد(اگر مناطق سیاه رنگ در نمونه دیده شد آنها حباب های هوا هستند که نباید آنها را اشتباها جزو ساختمان گیاه به حساب آورد)هسته به خوبی در میان فضای هر سلول قابل رویت می باشد.

رنگ آميزي ساده: انجام رنگ آمیزی به وسیله یک رنگ

رنگ آميزي مضاعف: انجام رنگ آمیزی به وسیله دو نوع رنگ

رنگ آمیزی ساده:

در اين روش كه به منظور مطالعه چگونگي وضع يك نوع بافت بكار مي رود برش تهيه شده را پس از بيرنگ كردن با آب ژاول به مدت نیم تا یک دقیقه در محلول يك رنگ ساده مي گذارند.ونوع بافت مورد نظر را با توجه به رنگي كه گرفته است تشخيص مي دهند. مثلاً بافت هاي چوبي يا چوب پنبه و کوتین با محلول رقیق بولودو متیلن به رنگ آبی در مي آيدو بر دیواره سلولزی سلول ها اثر ندارد وبافت هاي سلولزي بامحلول قرمز كنگو به رنگ قرمز در مي آيند.

رنگ آمیزی مضاعف يا مرکب:

در اين روش ابتدا برش ها را در يك محلول رنگ كننده بافت چوبي وچوب پنبه اي مانند آبي متيل ،سبز متيل يا فوشين قرار مي دهند وسپس آن ها را با يك محلول رنگ كننده با فت سلولزي مانند كارمن زاجي يا قهوه اي بيسمارك يا قرمز كنگو رنگ مي كنند. رنگ آميزي مضاعف چند نوع است كه متداول ترين روش آن در ادامه خواهد آمد.

شرح آزمايش:

رنگ آمیزی ساده :

مواد و وسایل لازم :

۱. دو عدد شیشه ساعت

۲. آب مقطر

۳. بلودومتیلن ، سبزید یا فوشین آمونیاکی

دستور کاررنگ آميزي :

۱.قرار دادن مقاطع در شیشه ساعت حاوی محلول رقيق بلودومتیلن به مدت نیم تا یک دقیقه

۲. شست و شو مقاطع باآب

توجه :

برای رنگ آمیزی با سبزید مقاطع را به مدت یک دقیقه در محلول سبزید برای رنگ آمیزی با فوشین آمونیاکی مقاطع را به مدت چند ثانیه در محلول فوشین آمونیاکی قرار داده وسپس شستشو مي

دهيم

نتیجه آزمایش :

۱. بلودومتیلن چوب ، چوب پنبه و کوتین را آبی رنگ و بر دیواره های سلولزی سلول ها اثري ندارد .

۲. سبزید بافت های چوب ، چوب پنبه و کوتین را به رنگ سبز متمایل به آبی در می آورد .

۳. فوشین آمونیاکی بافت های چوب ، چوب پنبه و کوتین را به رنگ قرمز در می آورد

.رنگ آمیزی مضاعف :

مواد و وسایل لازم :

۱. نه عدد شیشه ساعت

۲. یک عدد تیغ برای مقطع گیری

۳. آب مقطر

۴. آب ژاول

۵. اسید استیک

۶. بلودومتیلن ، سبزید یا فوشین آمونیاکی (برای تشخیص بافت های چوبی و چوب پنبه ای)

۷. کارمن زاجی (برای تشخیص بافت های سلولزی)

دستورکاررنگ آميزي :

در این نوع رنگ آمیزی دو دسته اصلی بافت

ها (بافت های چوبی و سلولزی) از هم متمایز می شوند که برای این کار از دو رنگ استفاده می شود که یکی سلولز و دیگری چوب ، چوب پنبه و کوتین را رنگ آمیزی می کند

مراحل رنگ آمیزی مضاعف:

۱. قرار دادن مقاطع میکروسکوپی (برش ها) در آب ژاول به مدت ۲۰- ۱۵ دقیقه

2.شستشو مقاطع با آب مقطر

۳. قرار دادن مقاطع در اسید استیک ۱% به مدت ۲- ۱ دقیقه

۴. شستشو مقاطع با آب مقطر

۵.قرار دادن مقاطع در محلول سبزید یا بلودومتیلن به مدت ۲- ۱ دقیقه

۶. شستشو مقاطع با آب مقطر

۷. قرار دادن مقاطع در محلول کارمن زاج دار به مدت

20- 15 دقیقه

۸.شستشو مقاطع با آب مقطر

نتیجه آزمایش :

۱. سلول های دارای دیواره سلولزی مانند پارانشیم ، کلانشیم ، آوندهای آبکشی و فیبر سلولزی به وسیله کارمن زاجي به رنگ قرمز متمایل به نارنجی در می آيند